抗病毒“神藥”達菲一直是H7N9病毒的有效“克星”，但復旦大學(xué)上海醫學(xué)院醫學(xué)分子病毒學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗室主任、上海市(復旦大學(xué)附屬)公共衛生臨床中心兼職教授袁正宏研究員領(lǐng)銜的應急檢測與生物安全實(shí)驗室新發(fā)傳染病研究團隊的一項“跟蹤”科研成果證實(shí)：個(gè)別患者在達菲抗病毒治療19天后仍在其咽拭子標本中檢測到H7N9病毒的重要組成部分“核酸”，這表明該病毒已出現基因突變和耐藥趨勢。5月29日，該成果已在線(xiàn)發(fā)表在國際頂尖醫學(xué)雜志《柳葉刀》(Lancet)上，引起世界同行高度關(guān)注。

　　為指導人感染H7N9禽流感病例病情判斷、臨床治療及病人出院等工作，袁正宏領(lǐng)銜的研究團隊承擔了檢測收治患者標本中H7N9病毒“核酸”載量的重要任務(wù)。在上海市(復旦大學(xué)附屬)公共衛生臨床中心應急病房醫護人員的配合、支持下，該團隊收集了病人在治療過(guò)程中多個(gè)時(shí)間點(diǎn)的咽拭子、血液、尿液和糞便標本，使用先進(jìn)的、自行設計的熒光定量RT-PCR方法對上述標本中的H7N9流感病毒“核酸”載量進(jìn)行了定量檢測，并對其中14例患者進(jìn)行了病毒載量與病情嚴重程度的相關(guān)性分析。結果發(fā)現，病癥相對較輕的患者在達菲治療中，咽拭子的病毒載量顯著(zhù)下降并較快轉陰；而重癥患者，特別是在后期需要依靠人工肺治療的患者，其咽拭子的病毒核酸載量在達菲治療過(guò)程中呈持續陽(yáng)性、甚至載量進(jìn)一步升高的罕見(jiàn)現象，并有個(gè)別患者在達菲抗病毒治療19天后仍在其咽拭子標本中檢測到了H7N9病毒的重要組成部分“核酸”。

　　為解釋上述不尋�，F象，課題負責人袁正宏研究員率領(lǐng)應急實(shí)驗室主任胡蕓文博士與王蔚、宋志剛等骨干對H7N9禽流感病毒的兩個(gè)最重要蛋白HA和NA，即患者標本中的這兩個(gè)病毒基因序列進(jìn)行擴增研究和多態(tài)性分析， 結果發(fā)現兩例重癥病例在抗病毒治療過(guò)程中其體內H7N9毒株的神經(jīng)氨酸酶(NA)“292位氨基酸”從R(精氨酸)突變?yōu)镵(賴(lài)氨酸)。也就是說(shuō)，在治療早期，292位是R，而治療后期這一位點(diǎn)卻呈現為K。

　　更重要的是，該實(shí)驗室運用先進(jìn)的“Q-PCR單核酸多態(tài)性分析法”，結果有了更為重大的發(fā)現：病人標本中“292R毒株”竟然出現了逐漸被“292K毒株”取代的過(guò)程。該結果提示：這一突變毒株的出現可能與達菲治療效果不佳有關(guān)。

　　袁正宏團隊聯(lián)想到“NA R292K”的突變曾出現在季節性H3N2流感病毒上，以后研究證明該病毒對達菲耐藥，更為巧合的是，該團隊在上海地區最早出現的H7N9病毒中也發(fā)現存在這一突變，但當時(shí)一直不清楚其臨床意義。本研究的重大意義在于首次將“NA 292位”氨基酸的“R/K突變”與臨床達菲療效不佳和不良預后聯(lián)系起來(lái)，并表明耐藥的基因突變可以在臨床抗病毒治療過(guò)程中被誘導產(chǎn)生，即病毒在藥物“壓力”下，會(huì )促使患者體內病毒產(chǎn)生變異突變，從而導致H7N9禽流感病毒已呈現耐藥性。香港大學(xué)微生物學(xué)家裴偉士教授的科研團隊參與了耐藥基因的發(fā)現和確認工作。

　　上海市H7N9禽流感防治專(zhuān)家組組長(cháng)、微生物學(xué)專(zhuān)家聞?dòng)衩吩菏空J為，該研究結果說(shuō)明，達菲治療依然對絕大部分患者有效，一旦確診應盡早治療；同時(shí)提示在達菲治療前和治療過(guò)程中必須要對病毒載量和耐藥“基因位點(diǎn)”進(jìn)行密切監測，及時(shí)調整治療方案，以提高救治成功率；此外，加快新藥研發(fā)顯得尤為重要。(孫國根 記者周凱)