3 檢測
擴展基因代碼方便對比
地點(diǎn):生物防護二級實(shí)驗室(PCR實(shí)驗室)
試管中的基因片段隨后將送進(jìn)PCR實(shí)驗室。
李曉丹說(shuō),PCR儀是核酸檢測病毒的關(guān)鍵設備。最近幾天,他們針對甲型H1N1流感開(kāi)發(fā)的檢測試劑盒,就將在這個(gè)環(huán)節發(fā)揮主要作用。
實(shí)驗人員將試管內的一組基因片段放入檢測試劑配置的反應液中,再置于PCR儀下,大概兩個(gè)半小時(shí)左右,每個(gè)基因片段都被放大,生成了大小不一的核酸擴展物CDNA(基因片段擴展物)。
同時(shí),另一部分通過(guò)反應液,被分裝在PCR小試管內的核酸RNA(核糖核酸),則可以在特制模板中,通過(guò)與目標病毒基因片段的定時(shí)定量比對,由實(shí)驗人員讀出結果:是否為甲型H1N1流感病毒。
李曉丹說(shuō),為了確保檢測結果的準確無(wú)誤差,這個(gè)定時(shí)定量PCR檢測結果,只作為整個(gè)甲型H1N1流感病毒追索結論的一個(gè)參考。
4 確診
電泳膠內篩顯病毒“原形”
地點(diǎn):生物防護一級實(shí)驗室(綜合實(shí)驗室)
裝有不同基因片段擴展物的微小試管被送進(jìn)綜合實(shí)驗室,這里的關(guān)鍵設備是盛滿(mǎn)了瓊脂糖凝膠、兩頭插著(zhù)正負電極的矩形電泳檢測儀。
利用移液器,實(shí)驗人員將試管中微量的無(wú)色透明液體染色后,再放入充了電的膠“池”。
在電壓牽引推動(dòng)下,膠池的表面開(kāi)始密集冒起小氣泡,“那是病毒的基因擴展物在向另一個(gè)方向走,個(gè)頭大的產(chǎn)物走得慢,越是個(gè)頭小的產(chǎn)物走得越快!崩顣缘ふf(shuō),瓊脂糖凝膠電泳儀就像一面篩子,把病毒中每個(gè)基因片段都以特定的“大”、“小”影像顯現出來(lái)。
當然,上述景象人的肉眼無(wú)法看到。實(shí)驗人員讓“膠池”充電40分鐘,確保所有的擴展物都“運動(dòng)”起來(lái)后,將“膠池”放進(jìn)另一個(gè)特制的方形“鐵柜”中,這其實(shí)是一部紫外線(xiàn)下工作的“照相機”———凝膠成像儀。
成像儀內,紫外線(xiàn)燈發(fā)光,照射在凝膠上,然后對膠中染色發(fā)光的擴展物自動(dòng)拍照,并輸出在連接的電腦屏幕上。
李曉丹介紹,電腦中還能同時(shí)調出甲型H1N1流感病毒基因序列圖,在同一個(gè)位置上,受檢病毒的數個(gè)基因片段擴展物大小與參照物完全相合,就能夠最終判斷,標本送檢患者感染了甲型H1N1流感病毒。
反之,排除感染可能。
李曉丹說(shuō),從病毒標本送至實(shí)驗室到最終檢測出結果,約需4—6小時(shí)。
甲型H1N1病毒檢測程序
醫生對疑似患者的鼻液或喉液取樣
送入流感網(wǎng)絡(luò )實(shí)驗室
提取多個(gè)基因片段,對逐個(gè)基因片段進(jìn)行擴展(放大)
擴展物入膠染色,在紫外線(xiàn)燈下發(fā)光成像
與電腦中儲存的目標病毒基因片段對比,同一位置上,大小是否完全一致
若一致則能夠最終判斷,標本送檢患者感染了甲型H1N1流感病毒
本組稿件采寫(xiě)/本報記者 魏銘言 本組稿件攝影/本報記者 王申
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